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生态农业种植
崛起农业食用菌原种的灭菌、接种与培养

崛起农业食用菌原种的灭菌、接种与培养

2021-01-14 09:47:30

灭菌

分装好的原种瓶,要当天灭菌,以免培养基发霉变质。灭菌方法有二种,即高压蒸汽灭菌和常压蒸汽灭菌。


1、高压蒸汽灭菌

先将锅内加入足够的水,将菌种瓶整齐地排放在锅内,盖上锅盖,对角拧紧锅盖上的螺丝,勿使漏气。用电炉或者煤火加热,当压力达到0.05兆帕时,打开放气阀(或开始就打开放气阀),排空锅内冷空气,放气10-15分钟左右,再关闭放气阀继续加热,当压力升到0.15兆帕时,调整火力使压力维持在0.14-0.15兆帕下灭菌。麦粒和谷粒培养基灭菌120分钟;棉籽壳、玉米芯、木屑培养基灭菌90-100分钟。灭菌完毕,关闭热源,待压力自然降到0时,打开放气阀将锅内空气排尽后,再打开锅盖取出菌种瓶。

2、常压蒸汽灭菌

锅内加足水,先用大火加热,使蒸汽上足后,用小火保持沸点温度。在loo℃左右的沸点温度下维持12-16小时以上,停火焖1夜后出锅。麦粒和谷粒培养基灭菌时间要相应延长。为了确保灭菌效果,麦粒和谷粒培养基尽量不要采用常压灭菌法。


食用菌


食用菌接种

1、培养基冷却

将灭过菌的培养基从锅内取出,置于干净的室内冷却,待灭过菌的培养基温度降至30℃以下时,搬入消毒好的接种箱(室)内消毒接种。

2、接种场地的消毒

在接种前先对接种场地和接种设施进行彻底的清洁,然后用甲醛加高锰酸钾或者克霉灵等气雾消毒剂熏蒸消毒30分钟。再将灭过菌的料瓶和接种用具(酒精灯和接种钩等)一同放入接种室(箱)内,用甲醛加高锰酸钾再一次进行熏蒸消毒,同时配合紫外灯照射消毒等方法。具体消毒方法及药品用量参见“母种的转接”。

3、接种方法

首先将母种试管外壁用75%的酒精棉球表面消毒后带入接种室(箱);点燃酒精灯,用75%的酒精棉球再次对试管外壁和管口处表面消毒:取下试管棉塞后,试管口在火焰上烧一下,然后用经火焰灭菌并已冷凉的接种钩将母种斜面分成6-8份,在酒精灯火焰形成的无菌区内,用接种钩取一份母种迅速准确地放入料瓶内的接种穴处,棉塞过火后塞好,包上包头纸。如此反复,每支母种可扩接原种6-8瓶。接完种,贴上标签。


培养

将接种好的原种放置培养室内进行培养,培养室要求干燥、黑暗、通风良好,温度控制在20℃ -24℃,空气相对湿度在60%左右。培养期间每周检查1次菌丝生长情况和杂菌发生情况,若发现有污染的菌种瓶应立即淘汰,并隔离污染源。


一般在适温下30天左右菌丝即可发满菌种瓶,菌丝长满后,尽快使用;若暂时不用,也可置于低温、干燥条件下短期保存。


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